位相差顕微鏡に関する基礎知識｜歯科のための位相差顕微鏡活用・実践マニュアル

デンタルダイヤモンド社のベストセラー書籍『歯科のための位相差顕微鏡活用・実践マニュアル』のコンテンツの一つを特別公開！
「位相差顕微鏡に関する基礎知識」についてです。

位相差顕微鏡に関する基礎知識

１．おもな顕微鏡の種類と特徴^１）

２．位相差顕微鏡とは

　位相差顕微鏡は、生きた細胞をそのまま観察できる数少ない手段であり、染色や固定をせずに内部構造を把握できるのが大きな特徴です。
１）基本原理
　通常の明視野顕微鏡は透明な細胞や微生物などが見えにくく、これらの試料を「見える化」するのが位相差顕微鏡です。「屈折率の差によって光の波（位相）がずれる」現象を利用し、コントラストをつけて観察可能にします。
２）構成要素
・対物レンズ内に位相差板が組み込まれている
・コンデンサーにリング絞り（偏光フィルター）を装着する
３）仕組み
　コンデンサーのリング絞りから出る環状の光（リング照明）を試料に当てると、試料を通過した光は「直進光（背景）」と「回折光（試料により曲げられた光）」に分かれ、対物レンズ内の位相差板が直進光にのみ位相ズレを与えます（1/4波長分ずらす）。回折光と直進光が干渉し合い、位相の違いでコントラストが強調され、透明な細胞内部の構造が明瞭に可視化されます。
　試料の周囲にハロ（明暗の縁取り状の光）が発生しやすいため、対象物のサイズや配置には注意が必要です。

【参考文献】
１）厚生労働省：分析方法の原理と分析機器の取扱方法 ⑴光学顕微鏡の基礎知識（原理と構造）
1.5 コントラスト観察法．https://www.mhlw.go.jp/content/000935619.pdf

●位相差顕微鏡とは何か：位相差顕微鏡ってどんなもの？はこちらから読めます。